Sporet h2s h1>

Enterotube, Atlas p. 56.

Enterotube II er en serie tester laget av Becton-Dickinson og Company for identifisering av den enteriske familien (Enterobacteriaceae) av eubakterier. Enterikerne er en stor familie som finnes overalt, men spesielt i de fleste dyr reduserer fordoyelseskanaler. Pa grunn av deres mange medlemmer er de ofte vanskelige a identifisere. Enterotube er et ror som inneholder tolv rom og femten tester, som hver inneholder riktig medium for hver test. (Tre kamre loper to tester hver: glukosefermentering med eller uten gass, H2S / Indol og dulcitol / fenylalanin.) Testene inkluderer: glukosefermentering, lysindekarboksylering, ornitindecarboksylering, H2S / indolproduksjon, adonitolfermentering, laktosefermentering, arabinose fermentering, sorbitolfermentering, Voges-Proskauer, Dulcitol-fermentering / fenylalanin-dekarboksylering, ureahydrolyse og Simmons citratutnyttelse. En inokulerer alle romene pa en gang ved a inokulere en ledning som gar gjennom hele roret.

(Med mindre det er oppdatert, er fremgangsmaten nedenfor ikke fullfort uten produsentens instruksjoner. Sorg for at du har produksjonsveiledningen for du starter denne prosedyren.)

Fjern kappene fra begge ender av roret for a eksponere den sterile inokuleringstraden.

Beror den spisse enden av ledningen til en isolert koloni pa en tallerken for a plukke opp bakterieceller. Pass pa at du ser noen celler pa ledningen.

Trekk ledningen ved a rotere den andre enden av roret for a inokulere alle rom i roret med bakteriene. Bruk en roterende bevegelse og hold oye med den spisse enden av ledningen, slik at du ikke fjerner den helt fra roret.

Nar wirepunktet er trukket til det siste rommet (glukose), bruk en vridningsbevegelse for a sette den inn i roret inntil rorpunktet ses i det siste rommet av citrat. Forsikre deg om at spissen av ledningen blokkerer apningen i den fjerne enden av roret. Dette vil skape en anaerob tilstand som er nodvendig for noen av delene.

Na, boy handtakets ende av ledningen frem og tilbake (uten a flytte ledningen inne i roret) til den gar av, kan du bruke tang eller noe som ligner pa a bryte av handtaket. Hold det odelagte handtaket for neste trinn.

Na flamme det odelagte handtaket eller en nal eller et lignende verktoy, slik at du har noe sterilt for a perforere rommene som trenger oksygen.

De siste atte rommene (adonitol til citrat) ma v re apne for luften. Vri over roret og legg merke til at den flate siden bare har en plastbelegg. Bruk det sterile handtaket eller et annet verktoy for a perforere plastdekselet til de rommene som trenger luft. Pass pa a ikke perforere sa langt at du berorer det faste media i roret. Folgende siste atte rom ma perforeres for aerobiske forhold: adonitol, laktose, arabinose, sorbitol, Voges-Proskauer, dulcitol / PA, urean og citrat.

Bytt begge dekslene pa enden av rorene.

Inkuber roret flatt siden ned ved 37 grader Celsius i 18-24 timer. Pass pa at det er plass mellom rorene for a sikre luftcirkulasjon.

Resultatene av testene er lest i tre deler fordi indol og Voges-Proskauer-rommene ma ha tilsatt ingredienser.

Forst les alle testene bortsett fra indol- og Voges-Proskauer-testene. Sammenlign dem med en negativ kontroll hvis det er nodvendig. Disse testene ma leses for testing for indol og Voges-Proskauer da de tilsatte reagensene kan kaste ut resultatene.

Glukose: rodt er negativt, noe gult hvor som helst, er positivt for gj ring (oransje i utilsiktet).

Gassproduksjon i glukose: voksoverlegg ikke loftet er negativ, voks loftes er positiv. (Dette er det eneste sukker hvor gassproduksjonen testes.)

Lysin-dekarboksylase: gul er negativ, noen lilla eller grad av lilla er positiv (er en alkalisk reaksjon).

Ornitin-dekarboksylase: gul er negativ, noen lilla eller grad av lilla er positiv (er en alkalisk reaksjon).

H2S produksjon: beige er negativ, en svart farge eller presipitat er positiv. Brun er negativ. Den svarte fargen kan forsvinne hvis den leses etter 24 timer.

Indole: hopp over for na.

Adonitol gj ring: rod er negativ, noe gult hvor som helst er positivt for gj ring (oransje i utilsiktet).

Laktosefermentering: rod er negativ, noe gul hvor som helst, er positivt for gj ring (oransje i utilsiktet).

Arabinose-gj ring: rod er negativ, noe gult hvor som helst, er positivt for gj ring (oransje i utilsiktet).

Sorbitol gj ring: rod er negativ, noe gult hvor som helst, er positivt for gj ring (oransje i utilsiktet).

Voges-Proskauer: hopp over for na.

Dulcitol gj ring: gronn er negativ, noe gul hvor som helst er positivt for gj ring.

PA (fenylalanin deaminase): gronn er negativ, en roykfarge til en svart farge er positiv (dyp gronn er negativ).

Urea hydrolyse: beige er negativ, en rod til en lilla farge er positiv, en rosa farge er en svak positiv.

Citratutnyttelse: Gront er negativt, en bla farge hvor som helst i noen grad er positiv.

Na utfor indoletesten ved a legge to draper Kovacs reagens gjennom plastfilmen pa den flate siden av indolkammeret. Bruk en nal eller apne hullet bredere for a sette inn drapene. La slippene sitte pa mediet i 10 sekunder. Se etter tilstedev relsen av en rosa til rod farge som er positiv for produksjonen av indol.

Na utfor Voges-Proskauer testen. Plasser roret opp og ned slik at den flate siden vender opp. Tilsett tre draper losning A og to draper 20% kaliumhydroksid med kreatin. Inkuber dette med drapene som berorer mediet i 20 minutter. Hvis en rod farge utvikler seg, er testen positiv.

Kast inn Enterotube II i autoklavposene.